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賽默飛（Thermo Fisher Scientific）Legend Micro 21R 高速冷凍離心機是一款為分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、臨床檢測與蛋白質(zhì)研究而設(shè)計的高性能微量離心機。該設(shè)備以高轉(zhuǎn)速（最高 21,100 rpm）、精準(zhǔn)溫控（–10 ℃ 至 +40 ℃）和優(yōu)異的安全性能而聞名。
它能快速實現(xiàn)樣品分層、沉淀、提取與純化，在核酸、蛋白、細(xì)胞組分分離等實驗中表現(xiàn)出高效率與高重復(fù)性。為了最大化設(shè)備性能并延長使用壽命，操作者需熟悉正確的使用技巧與優(yōu)化操作方法。
將離心機放置于平穩(wěn)、堅固的實驗臺面上，遠(yuǎn)離震動源與熱源。
環(huán)境溫度保持在 10–35 ℃，相對濕度低于 80%。
設(shè)備四周留出至少 10 cm 空間，保證空氣流通與散熱。
確保供電電壓與銘牌參數(shù)一致（通常為 AC 220 V，50 Hz）。
插座必須帶有接地保護，避免因靜電或漏電造成設(shè)備損壞。
打開蓋門檢查腔體內(nèi)部是否干凈，無液體或異物。
檢查轉(zhuǎn)子、適配器和主軸表面是否完好、無裂痕。
檢查密封圈彈性良好，確保蓋門關(guān)閉后能完全鎖定。
對于低溫敏感樣品（如酶、蛋白質(zhì)、核酸等），應(yīng)提前預(yù)冷：
在空載狀態(tài)下設(shè)定目標(biāo)溫度（如 4 ℃），運行 10–15 分鐘。
若實驗在高溫環(huán)境進行，可延長預(yù)冷時間以防溫度波動。
所有離心管必須 對稱放置，重量差不得超過 0.01 g。
若樣品數(shù)量為奇數(shù)，可用等體積水替代空管平衡。
液體體積不應(yīng)超過管體的 80%，防止離心時溢出。
樣品管蓋必須擰緊，避免氣溶膠或液體外泄。
使用高精度分析天平配平，尤其在高轉(zhuǎn)速（>15,000 rpm）條件下。
當(dāng)樣品種類不同、密度差異大時，建議以“總質(zhì)量”而非“體積”配平。
平衡管材料、品牌及型號應(yīng)與實驗樣品管一致，以減少微差。
對含揮發(fā)性或腐蝕性溶液樣品，應(yīng)采用防氣溶膠密封轉(zhuǎn)子蓋。
處理粘稠樣品時，離心管底部可先加入少量緩沖液以防沉淀粘附。
根據(jù)樣品性質(zhì)設(shè)定合適轉(zhuǎn)速：
細(xì)胞沉淀：1,000–3,000 rpm
蛋白沉淀：10,000–14,000 rpm
核酸提取：12,000–15,000 rpm
病毒與亞細(xì)胞分離：18,000–21,000 rpm
不可超過轉(zhuǎn)子銘牌標(biāo)示的最高允許轉(zhuǎn)速。
如果儀器以 rpm 顯示，可用以下公式換算為離心力（RCF）：
RCF=1.118×10?5×r×(rpm)2RCF = 1.118 \times 10^{-5} \times r \times (rpm)^2RCF=1.118×10?5×r×(rpm)2
其中，r 為轉(zhuǎn)子半徑（cm）。根據(jù)實驗需求調(diào)節(jié)離心力更為精確。
常用溫度為 4 ℃，用于保護生物活性樣品。
對一般樣品（如血漿、沉淀液）可使用室溫模式。
低于 0 ℃ 的離心操作應(yīng)提前預(yù)冷轉(zhuǎn)子與離心管。
Soft 模式：適合蛋白質(zhì)、細(xì)胞等易碎樣品。
Rapid 模式：適用于短時間核酸或顆粒分離。
根據(jù)樣品脆弱性選擇啟動曲線可顯著提升分離效果。
開機后系統(tǒng)會自動檢測蓋鎖、溫度傳感器與電機狀態(tài)。若顯示錯誤代碼，應(yīng)立即停止操作并檢查原因。
不可在設(shè)備運行時打開蓋門。
若聽到異常噪音或振動，立即按下 STOP 鍵。
避免在離心過程中頻繁更改參數(shù)，以免造成系統(tǒng)誤差。
等待轉(zhuǎn)子完全停止且顯示屏提示“END”后再開蓋。
取樣時動作輕柔，防止沉淀層擾動。
清除腔體內(nèi)冷凝水或樣品殘液，保持干燥。
將樣品按編號順序放置于轉(zhuǎn)子上，記錄位置，防止混淆。
若需連續(xù)運行多個批次，可在每次操作間隔 5–10 分鐘以防過熱。
固定角轉(zhuǎn)子：用于核酸、蛋白等高轉(zhuǎn)速沉淀。
水平轉(zhuǎn)子：適合密度梯度分離與細(xì)胞樣品。
PCR排管轉(zhuǎn)子：專用于0.2 mL PCR管，方便批量操作。
根據(jù)實驗需求選型能大幅提高分離效果與效率。
設(shè)定溫度前先讓設(shè)備在設(shè)定點下預(yù)冷運行。
若實驗室環(huán)境較冷，啟動制冷模式前可讓設(shè)備空載運行 2 分鐘。
避免頻繁開關(guān)蓋門，防止冷氣外泄。
對于需快速沉淀的樣品，可采用“脈沖離心”：
設(shè)置短時間（30–60 秒）的高速運行，快速形成沉淀。
此法常用于收集小體積溶液底部樣品。
離心后輕輕倒置或輕拍離心管底部，防止沉淀粘壁。
避免使用劇烈震蕩或吹打方式，以免破壞結(jié)構(gòu)。
每次運行前務(wù)必確認(rèn)樣品配平正確。
使用不平衡檢測系統(tǒng)測試傳感器靈敏度。
一旦出現(xiàn)震動或報警，立即停機重新配平。
使用設(shè)備自動轉(zhuǎn)子識別功能，防止誤設(shè)過速。
若更換非原裝轉(zhuǎn)子，必須重新校準(zhǔn)最大轉(zhuǎn)速。
確保通風(fēng)孔暢通、冷凝器干凈。
長時間運行后，適當(dāng)休機散熱。
離心前確認(rèn)離心管密封良好。
使用防氣溶膠蓋處理潛在生物危害樣品。
離心結(jié)束后及時消毒腔體。
| 常見誤區(qū) | 可能后果 | 正確做法 |
|---|---|---|
| 樣品未配平 | 振動嚴(yán)重、主軸損傷 | 使用天平精確配平 |
| 離心管未封口 | 液體外泄、污染設(shè)備 | 使用合適密封管 |
| 超過最大容量 | 液體溢出、轉(zhuǎn)子腐蝕 | 控制裝液量 ≤80% |
| 未預(yù)冷即高速運行 | 樣品變性 | 預(yù)冷 10–15 分鐘 |
| 離心后立即開蓋 | 轉(zhuǎn)子未停穩(wěn)傷人 | 等待顯示“END”后開蓋 |
| 用強酸清潔 | 腔體腐蝕 | 使用中性清潔劑 |
核酸提取實驗
使用 12,000–15,000 rpm 離心 10 分鐘。
保持 4 ℃ 運行，防止 DNA 降解。
上清液清澈無濁度即為最佳效果。
蛋白質(zhì)沉淀實驗
使用低速離心去除雜質(zhì)，再進行高速分離。
控制溫度在 4 ℃，避免蛋白失活。
細(xì)胞收集實驗
先以 800–1,000 rpm 低速收集細(xì)胞。
避免轉(zhuǎn)速過高造成細(xì)胞裂解。
病毒純化實驗
使用密度梯度離心法，控制轉(zhuǎn)速穩(wěn)定。
確保溫度恒定，減少剪切力。
擦拭腔體、轉(zhuǎn)子與主軸，防止腐蝕。
將蓋門半開保持干燥，避免冷凝。
建立運行日志，記錄使用次數(shù)、運行時間、異常情況。
每3個月檢查一次主軸、門鎖與制冷系統(tǒng)。
清潔后晾干，表面涂防銹油。
長期不使用時單獨密封存放。
程序化操作
使用設(shè)備的記憶功能，存儲常用離心程序，提高重復(fù)實驗效率。
批量管理
提前準(zhǔn)備多套平衡管和轉(zhuǎn)子，提高實驗通量。
溫控優(yōu)化
在樣品準(zhǔn)備階段即可開啟制冷系統(tǒng)，減少等待時間。
快速校準(zhǔn)
每周檢測一次轉(zhuǎn)速與溫度精度，保證離心效果一致性。
合理安排運行順序
將低溫樣品安排在前，高溫樣品在后，避免頻繁切換制冷模式。
避免連續(xù)超負(fù)荷運行：每次運行結(jié)束后間隔至少 10 分鐘。
保持良好通風(fēng)：防止壓縮機過熱。
定期潤滑主軸：每三個月涂抹少量真空硅油。
防止化學(xué)腐蝕：禁止樣品外溢或使用強酸強堿溶液。
年度檢修：每12個月進行一次全面校準(zhǔn)與維護。
| 故障現(xiàn)象 | 可能原因 | 解決方案 |
|---|---|---|
| 無法啟動 | 電源未接通或保險絲損壞 | 檢查插頭及更換保險絲 |
| 噪音過大 | 樣品不平衡或轉(zhuǎn)子安裝不牢 | 重新配平、檢查轉(zhuǎn)子鎖緊 |
| 溫度不下降 | 冷凝器堵塞 | 清潔通風(fēng)口或聯(lián)系技術(shù)支持 |
| 報警代碼出現(xiàn) | 系統(tǒng)檢測異常 | 查閱用戶手冊代碼解釋并排查 |
| 轉(zhuǎn)速偏差 | 電機控制誤差 | 重新校準(zhǔn)轉(zhuǎn)速控制系統(tǒng) |
操作前必須熟悉緊急停止按鈕的位置。
禁止在運行中嘗試開蓋或移動設(shè)備。
處理生物危險樣品時，使用密封蓋并佩戴防護裝備。
發(fā)現(xiàn)液體滲漏或異味時立即停止使用。
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