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賽默飛（Thermo Fisher Scientific）BioMate 160 分光光度計是一款廣泛應用于生命科學、醫(yī)學、環(huán)境監(jiān)測、藥物檢測及教學實驗的紫外-可見分光光度計。儀器操作簡便，檢測結(jié)果穩(wěn)定，但要獲得準確可靠的數(shù)據(jù)，必須嚴格遵循使用注意事項。本文將系統(tǒng)介紹從儀器準備到維護全過程中的操作要點，幫助實驗人員正確使用該設備，避免因操作不當導致的誤差或故障。
溫度與濕度：實驗室應保持在 20–25 ℃，濕度控制在 40%–60%。溫濕度過高會影響光學元件穩(wěn)定性，過低則可能產(chǎn)生靜電干擾。
電源穩(wěn)定性：電壓要求 220 V±10%，應避免電壓波動過大，必要時使用穩(wěn)壓電源。
環(huán)境光控制：避免強光直射或強烈散射光，以減少光學干擾。
防塵與通風：實驗室應清潔，儀器周圍保持通風，避免灰塵進入光學系統(tǒng)。
光源檢查：氘燈和鎢燈壽命有限，應定期檢查亮度和穩(wěn)定性。
比色皿槽檢查：確保比色皿槽內(nèi)無異物和污漬。
開機自檢：開機后觀察自檢結(jié)果，確認光源、檢測器和電路狀態(tài)正常。
溶液澄清度：樣品必須澄清透明，若有渾濁需離心或過濾。
濃度范圍：吸光度宜控制在 0.1–1.0 范圍，過高需稀釋。
對照液準備：參比溶液與樣品溶劑必須一致，以保證校準準確。
避免氣泡：加樣時應避免產(chǎn)生氣泡，否則會影響光路。
開機后應先選擇所需光源，并預熱 10–15 分鐘，使光源達到穩(wěn)定狀態(tài)。
不宜頻繁開關光源，以延長燈泡壽命。
波長應根據(jù)實驗要求準確設定。
波長校準應定期進行，防止偏差導致測定誤差。
使用石英比色皿進行紫外檢測，使用光學玻璃比色皿進行可見光檢測。
比色皿外壁必須保持清潔，無指紋、水滴或劃痕。
比色皿放入時方向需保持一致，以減少光程差異造成的誤差。
在正式測定前必須進行空白校準。
校準液體應為與樣品相同的溶劑或緩沖液。
樣品應迅速測定，避免因光照或氧化造成性質(zhì)改變。
對動力學實驗，應保持溫度恒定，保證曲線平滑。
多次測定時，樣品應充分混勻后再取用，避免濃度不均。
對核酸和蛋白質(zhì)檢測，應保證純度，避免鹽離子或有機物干擾。
對細胞懸液，應在測定前輕輕混勻，避免沉降或團聚。
每個樣品至少重復測量三次，取平均值。
在定量實驗中，應先繪制標準曲線，再對未知樣品進行計算。
對酶動力學實驗，應設定合適的采樣間隔。
對核酸檢測，需同時記錄 A260、A280 和 A230，進行純度判斷。
對蛋白質(zhì)檢測，若采用染料法，應在合適波長（如 595 nm）檢測。
對生長曲線監(jiān)測，應定時測量 OD600，避免過度稀釋或濃縮。
每次實驗后，應及時清理比色皿槽，避免殘留液體腐蝕。
比色皿應用專用清潔液清洗，并避免接觸硬物劃傷。
光學窗口應用無塵布輕拭，嚴禁使用粗糙紙巾。
光源燈泡壽命有限，氘燈一般 1000 小時左右，應及時更換。
定期進行波長校正和光度校正，保證數(shù)據(jù)準確性。
定期檢查風扇與散熱口，防止灰塵堵塞。
若儀器長期停用，應切斷電源，覆蓋防塵罩。
光源應取下單獨保存，避免受潮或損壞。
吸光度異常偏高
預防：避免樣品過濃，確保比色皿干凈。
處理：適當稀釋樣品并重新測定。
基線漂移
預防：保證光源充分預熱，保持比色皿清潔。
處理：重新進行空白校準。
重復性差
預防：規(guī)范操作，避免樣品分層。
處理：重新混勻樣品，多次取樣測定。
燈泡亮度不足
預防：減少頻繁開關燈源。
處理：更換氘燈或鎢燈。
波長偏差
預防：定期進行校準。
處理：聯(lián)系專業(yè)人員進行維護。
操作人員需佩戴實驗服、手套和護目鏡。
對含有有毒或強腐蝕性樣品，應在通風櫥內(nèi)操作。
樣品溢出應立即清理，避免腐蝕比色皿或儀器。
每次測定應詳細記錄波長、樣品編號、吸光度值。
對關鍵實驗，應保存光譜數(shù)據(jù)文件以便復查。
使用人員必須經(jīng)過培訓，熟悉儀器原理與操作規(guī)程。
不得由未經(jīng)授權(quán)的人員私自操作或拆卸儀器。
注意比色皿使用石英材質(zhì)；
檢測前避免 RNA 降解；
A260/A280 比值應在 1.8–2.0。
若采用紫外吸收法，避免緩沖液中含有吸收干擾物；
若采用染料法，應在標準曲線濃度范圍內(nèi)測定。
溫度控制至關重要；
實驗過程中保持恒溫，避免反應速率波動。
在 OD600 測定時，必須輕柔混勻培養(yǎng)液；
防止細胞沉淀導致數(shù)據(jù)失真。
自動化升級
與自動進樣系統(tǒng)結(jié)合，減少人工誤差。
信息化管理
數(shù)據(jù)可直接上傳至實驗室管理系統(tǒng)，實現(xiàn)追溯與共享。
智能診斷
儀器具備自我診斷功能，自動提醒光源壽命與校準情況。
賽默飛分光光度計 BioMate 160 在科研與教學中發(fā)揮著重要作用。要確保實驗結(jié)果準確可靠，必須在 環(huán)境條件、樣品準備、操作細節(jié)、維護保養(yǎng)、安全規(guī)范 等方面嚴格遵循使用注意事項。只有通過規(guī)范化管理和科學化操作，才能最大程度發(fā)揮該儀器的性能，為科研和應用提供有力支持。
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