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NanoDrop Eight 是 Thermo Fisher Scientific 推出的一款多通道超微量分光光度計，專為高通量檢測設計。它能夠在一次運行中同時檢測 8 個樣品，樣品需求量僅需 1–2 微升，廣泛應用于核酸、蛋白質以及帶有熒光標記物的分子定量分析。掌握其詳細操作步驟是確保實驗結果準確可靠的關鍵。本章將從開機準備到結果導出，逐一解析操作流程。
設備檢查
確認儀器電源、顯示屏及光學臂正常。
檢查檢測平臺是否干凈無殘留液體。
檢查八通道檢測孔是否無塵、無劃痕。
環(huán)境要求
放置在穩(wěn)固的實驗臺上，避免震動。
室溫保持在 20–25℃，濕度適中。
避免陽光直射，保持干燥環(huán)境。
樣品準備
提前配制檢測所需的核酸、蛋白質或其他樣品。
使用去離子水或對應緩沖液作為空白對照。
樣品濃度不宜過高，如超出范圍需稀釋。
移液器、無酶吸頭、無核酸污染操作環(huán)境。
電源開啟
接通電源后按下開關鍵，設備開始自檢。顯示屏會自動加載主界面。
預熱光源
初次開機或長時間未使用時，需預熱 2–3 分鐘以穩(wěn)定光源。
軟件登錄
選擇用戶賬號進入系統(tǒng)界面，方便保存和區(qū)分數(shù)據(jù)。
基線校正
滴加 1–2 微升空白緩沖液于檢測平臺。
合上光學臂，選擇“Blank”進行校正。
系統(tǒng)自動記錄基線，保證后續(xù)結果準確。
使用移液器取 1–2 μL 樣品，緩慢滴加在檢測孔中央。
確保液滴覆蓋檢測窗口，避免氣泡或液體外溢。
對于多樣品檢測，可依次加載 8 個孔位。
NanoDrop Eight 內置多種模式：
核酸模式：在 260 nm 檢測 DNA、RNA 濃度。
蛋白質模式：在 280 nm 檢測蛋白濃度。
全波長掃描：190–850 nm，獲取完整光譜。
熒光染料模式：針對 Cy3、Cy5 等標記物。
用戶根據(jù)實驗需求選擇相應模式。
合上光學臂，點擊“Start”。
儀器自動進行掃描，單次測定約需 5–10 秒。
結果包括吸光度、濃度、純度比值及光譜曲線。
濃度值：自動計算并顯示。
純度比值：如 A260/A280、A260/A230，幫助評估樣品質量。
光譜曲線：直觀展示吸收峰。
保存結果
點擊“Save”，結果自動存入系統(tǒng)存儲器。
可按樣品編號或日期進行命名。
導出數(shù)據(jù)
USB 接口導出：生成 Excel 表格或 PDF 報告。
網(wǎng)絡接口導出：可直接傳輸至實驗室服務器。
批量處理
軟件支持多樣品曲線疊加對比。
自動生成統(tǒng)計報告，含平均值、標準差。
檢測值不穩(wěn)定
原因：液滴未完全覆蓋窗口或有氣泡。
解決：重新取樣，確保操作規(guī)范。
純度比值偏低
原因：樣品中有鹽類、蛋白或有機物污染。
解決：重新提取或純化樣品。
濃度過高提示
原因：樣品吸光度超出檢測范圍。
解決：稀釋后重新檢測。
信號異常弱
原因：檢測平臺未清潔干凈。
解決：用無絨紙或去離子水清潔窗口。
清潔
每次測量后立即清潔檢測平臺。
使用去離子水或 70% 乙醇清洗，防止殘留。
關機保養(yǎng)
長時間不使用應關閉電源。
建議覆蓋防塵罩，避免灰塵進入。
校準與檢測
定期進行標準溶液檢測，確認性能。
必要時聯(lián)系廠家進行維護保養(yǎng)。
RNA 檢測
滴加 RNA 樣品 2 μL，結果顯示濃度 150 ng/μL，A260/A280 值為 2.0，表明純度良好。
蛋白質檢測
檢測 BSA 溶液，結果濃度 2.4 mg/mL，符合實驗預期。
多樣品檢測
同時加載 8 個 DNA 樣品，短時間內獲得完整檢測結果。
NanoDrop Eight 的操作步驟簡潔明了，主要流程包括：
操作前準備與基線校正；
樣品加載與模式選擇；
自動檢測與結果查看；
數(shù)據(jù)保存與導出；
清潔與維護。
其優(yōu)勢體現(xiàn)在：
樣品體積極小，避免浪費；
八通道同時檢測，大幅提高效率；
檢測結果直觀可靠，便于數(shù)據(jù)管理；
適用于核酸、蛋白質及多種標記分子。
通過規(guī)范的操作步驟，NanoDrop Eight 能夠為科研人員提供高效、準確的實驗數(shù)據(jù)，成為分子生物學和生物醫(yī)學實驗室的重要工具。
