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質(zhì)保3年只換不修，廠家長(zhǎng)沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司

一、儀器概述

伯樂電穿孔儀 165-2661 是伯樂公司為生物電轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的高精度電擊系統(tǒng)。
它通過控制高壓脈沖電場(chǎng)，使細(xì)胞膜暫時(shí)形成微孔，促使 DNA、RNA、蛋白質(zhì)或其他外源分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞轉(zhuǎn)化、基因?qū)搿⒎肿舆f送等操作。

該設(shè)備適用于細(xì)菌、酵母、植物原生質(zhì)體、動(dòng)物細(xì)胞以及真核單細(xì)胞系統(tǒng)，是現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)裝備之一。
165-2661 集成了高壓脈沖控制、能量管理、安全防護(hù)、數(shù)據(jù)記錄和自動(dòng)校準(zhǔn)等多種功能，操作簡(jiǎn)便，性能穩(wěn)定，重復(fù)性優(yōu)良。

二、主要技術(shù)參數(shù)

三、儀器組成

165-2661 主要由以下五部分組成：

1. 主機(jī)模塊：
   含高壓變壓器、電容儲(chǔ)能組、放電控制電路與信號(hào)采集單元，是能量轉(zhuǎn)換與輸出的核心。

2. ShockPod 電擊槽：
   電極觸點(diǎn)區(qū)，用于放置電擊杯。內(nèi)部采用高導(dǎo)電金屬材料，外層聚碳酸酯絕緣保護(hù)，耐壓高、散熱好。

3. 控制顯示界面：
   高亮液晶屏配合旋鈕與按鍵，可進(jìn)行電壓、電容、波形、次數(shù)、間隔等參數(shù)設(shè)置。

4. 安全防護(hù)系統(tǒng)：
   包含蓋鎖檢測(cè)、自動(dòng)放電回路、溫度監(jiān)控、過壓限流等功能，確保操作安全。

5. 數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)：
   自動(dòng)記錄每次實(shí)驗(yàn)的電壓、電容、時(shí)間常數(shù)及能量釋放率，支持 USB 導(dǎo)出與日志回溯。

四、開機(jī)與準(zhǔn)備

1. 環(huán)境要求

• 室溫 20–25 ℃，濕度 ≤70%；

• 臺(tái)面平穩(wěn)、干燥、絕緣；

• 避免陽光直射與高頻干擾源；

• 實(shí)驗(yàn)區(qū)保持通風(fēng)。

2. 檢查步驟

1. 電源線與接地線連接牢固；

2. ShockPod 內(nèi)部干燥無殘液；

3. 電擊杯潔凈無裂紋；

4. 控制面板無異物阻礙；

5. 打開電源，系統(tǒng)自檢顯示 “SELF TEST PASSED”。

如出現(xiàn)錯(cuò)誤代碼或報(bào)警聲，按提示檢查蓋鎖、電源或電容狀態(tài)。

五、樣品準(zhǔn)備

1. 細(xì)胞狀態(tài)

• 使用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞；

• 細(xì)菌濃度約 1×10? cells/mL，動(dòng)物細(xì)胞 10?–10? cells/mL；

• 酵母與原生質(zhì)體濃度適當(dāng)調(diào)低。

2. 緩沖液要求

• 導(dǎo)電率低于 1.5 mS/cm；

• 常用配方：10% 甘露醇或蔗糖 + 1 mM HEPES；

• pH 7.0–7.4，需過濾除菌。

3. 外源分子

• DNA / RNA / 蛋白質(zhì)應(yīng)純度高、無鹽；

• 每次使用前預(yù)冷至 4 ℃。

4. 預(yù)冷操作

• 樣品與電擊杯置冰上預(yù)冷 10 分鐘，減少熱損傷。

5. 裝樣

• 將樣品吸入電擊杯約 70–80% 容積，避免氣泡；

• 擦拭外壁，防止液體外溢造成電弧。

六、參數(shù)設(shè)置

1. 進(jìn)入設(shè)置菜單

按 “MENU” 鍵進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)定界面，可選擇：

• Manual Setup（手動(dòng)模式）

• Preset Protocol（預(yù)設(shè)方案）

2. 主要參數(shù)設(shè)置

3. 參數(shù)保存

設(shè)置完成后按 “SAVE” 并輸入方案名稱，例如 “Ecoli-2000V-25uF”。
系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)存儲(chǔ)，便于重復(fù)實(shí)驗(yàn)調(diào)用。

七、操作流程

1. 裝載電擊杯

• 將樣品裝好的電擊杯放入 ShockPod 槽內(nèi)；

• 壓下蓋子直至聽到“咔噠”聲；

• 屏幕顯示 “LID CLOSED”。

2. 放電操作

1. 按 “PULSE” 鍵進(jìn)入充電；

2. 顯示 “CHARGING…”；

3. 達(dá)到設(shè)定電壓后顯示 “READY TO PULSE”；

4. 按 “ENTER” 觸發(fā)放電；

5. 屏幕顯示放電電壓、時(shí)間常數(shù)與能量釋放；

6. 放電結(jié)束后自動(dòng)提示 “COMPLETE”。

3. 放電后處理

• 等待 10 秒確保電場(chǎng)完全釋放；

• 打開蓋子取出電擊杯；

• 將樣品立即加入恢復(fù)培養(yǎng)液中進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)。

八、樣品恢復(fù)

恢復(fù)階段有助于細(xì)胞膜孔道修復(fù)與基因表達(dá)啟動(dòng)。

九、數(shù)據(jù)記錄與導(dǎo)出

165-2661 自動(dòng)保存以下實(shí)驗(yàn)信息：

• 電壓、電容、時(shí)間常數(shù)；

• 實(shí)際波形與能量釋放百分比；

• 實(shí)驗(yàn)時(shí)間、編號(hào)、溫度。

數(shù)據(jù)導(dǎo)出方法：

1. 插入 USB 設(shè)備；

2. 菜單選擇 “Data → Export”；

3. 選擇單次或全部記錄；

4. 生成 .csv 文件，可用 Excel 打開分析。

十、安全操作注意事項(xiàng)

1. 確認(rèn)蓋鎖閉合，未閉合禁止放電；

2. 禁止在設(shè)備通電狀態(tài)下觸摸電極；

3. 樣品不得含高鹽或?qū)щ婋s質(zhì)；

4. 放電結(jié)束后至少等待 10 秒再取樣；

5. 每次實(shí)驗(yàn)間隔 ≥10 秒，防止電容過熱；

6. 實(shí)驗(yàn)區(qū)應(yīng)保持干燥，禁止液體濺出；

7. 若發(fā)現(xiàn)閃光、異味、異常噪聲，應(yīng)立即斷電；

8. 設(shè)備維修僅限專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行。

十一、常見問題及處理

十二、實(shí)驗(yàn)優(yōu)化建議

1. 控制導(dǎo)電率：確保緩沖液電導(dǎo)率 ≤ 1.5 mS/cm。

2. 優(yōu)化電場(chǎng)強(qiáng)度：起始電壓使用推薦值的 80%，逐步調(diào)整。

3. 防止熱損傷：樣品、電擊杯及 ShockPod 均應(yīng)預(yù)冷。

4. 合理設(shè)定 τ 值：細(xì)菌約 4–5 ms，哺乳動(dòng)物細(xì)胞約 7–8 ms。

5. 多脈沖優(yōu)化：對(duì)難轉(zhuǎn)染體系可設(shè) 2–3 次脈沖，間隔 1 s。

6. 數(shù)據(jù)記錄：保存 τ 與轉(zhuǎn)化效率對(duì)照表，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)積累參數(shù)。

十三、清理與維護(hù)

1. 日常清理

• 關(guān)閉電源并等待自動(dòng)放電完成；

• 用無水乙醇擦拭 ShockPod 和電擊杯外壁；

• 確保所有部件干燥后存放。

2. 定期維護(hù)

3. 儲(chǔ)存條件

• 環(huán)境溫度 10–35 ℃；

• 濕度 ≤70%；

• 遠(yuǎn)離腐蝕性氣體與強(qiáng)磁場(chǎng)；

• 長(zhǎng)期停用時(shí)斷開電源并覆蓋防塵罩。

十四、性能測(cè)試與校準(zhǔn)

1. 電壓輸出測(cè)試

使用標(biāo)準(zhǔn)高壓探頭測(cè)定輸出電壓，應(yīng)與設(shè)定值差 ≤ ±2%。

2. 時(shí)間常數(shù)驗(yàn)證

在標(biāo)準(zhǔn)負(fù)載下放電，測(cè)得 τ 值偏差 ≤ ±0.05 ms。

3. 能量釋放率檢測(cè)

通過系統(tǒng)自動(dòng)計(jì)算，釋放率應(yīng) ≥ 90%。

如超出范圍，請(qǐng)執(zhí)行系統(tǒng)“Auto-Calibration” 自動(dòng)校準(zhǔn)功能。

十五、系統(tǒng)運(yùn)行邏輯

1. 初始化：上電后自檢電源、電容、溫度與蓋鎖狀態(tài)；

2. 設(shè)定參數(shù)：用戶輸入或調(diào)用預(yù)設(shè)方案；

3. 充電階段：電容充至目標(biāo)電壓；

4. 放電階段：脈沖能量釋放至樣品；

5. 數(shù)據(jù)采集：系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)電壓、電流、τ 值；

6. 反饋記錄：計(jì)算能量釋放率，保存實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；

7. 安全放電：自動(dòng)釋放殘余電壓，提示“Safe to Open”。

十六、使用注意要點(diǎn)

• 每次實(shí)驗(yàn)前清理電極觸點(diǎn)；

• 不同樣品需使用不同規(guī)格電擊杯；

• 放電頻率不宜過高，防止電容積熱；

• 對(duì)高鹽樣品必須進(jìn)行離子置換；

• 建議定期更新實(shí)驗(yàn)參數(shù)數(shù)據(jù)庫；

• 若長(zhǎng)期未使用，應(yīng)先空載測(cè)試后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

十七、應(yīng)用領(lǐng)域概述

165-2661 可廣泛應(yīng)用于：

1. 細(xì)菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化與克隆實(shí)驗(yàn)；

2. 酵母及真核單細(xì)胞轉(zhuǎn)化；

3. 動(dòng)物細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染與藥物遞送；

4. 植物原生質(zhì)體基因?qū)耄?/span>

5. 納米載體、電穿孔藥物研究；

6. 疫苗及蛋白表達(dá)體系構(gòu)建。

其高精度參數(shù)控制和可重復(fù)放電特性，使其成為科研級(jí)與生產(chǎn)級(jí)實(shí)驗(yàn)的理想工具。

十八、優(yōu)勢(shì)總結(jié)

1. 高精度控制 —— 電壓與時(shí)間常數(shù)誤差極低；

2. 雙波形選擇 —— 兼顧不同細(xì)胞體系；

3. 自動(dòng)安全防護(hù) —— 多重聯(lián)鎖設(shè)計(jì)；

4. 數(shù)據(jù)追溯功能 —— 實(shí)驗(yàn)記錄自動(dòng)保存；

5. 模塊化維護(hù) —— 拆裝便捷、易于保養(yǎng)；

6. 穩(wěn)定可靠性 —— 連續(xù)放電上千次性能不衰減。

十九、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程簡(jiǎn)表