伯樂Genepulser Xcell電穿孔儀操作注意事項

質保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司

一、前言

伯樂Genepulser Xcell電穿孔儀是一款高精度的生物電轉化設備，主要用于通過瞬時高壓脈沖改變細胞膜通透性，使外源DNA、RNA或蛋白質進入細胞，從而實現(xiàn)基因導入或轉染。
由于該設備在工作過程中涉及高電壓放電與敏感生物樣品的處理，因此操作安全與技術規(guī)范尤為重要。科學的操作注意事項不僅能保證實驗結果的可靠性與可重復性，還能延長設備使用壽命、減少故障風險。
本技術文件將系統(tǒng)介紹在設備操作前、中、后各階段應遵守的注意事項，供科研人員及實驗管理人員參考。

二、操作前注意事項

1. 實驗環(huán)境要求

為確保電穿孔實驗的穩(wěn)定性，操作環(huán)境應符合以下條件：

• 溫度控制：實驗室溫度應保持在18℃–25℃之間，避免極端溫度影響電氣元件穩(wěn)定性。

• 濕度要求：相對濕度不超過70%，過高濕度可能導致漏電或電弧放電。

• 電源條件：使用穩(wěn)定的交流電源（220V ±10%，50Hz），實驗臺應具備良好接地。

• 防干擾條件：避免與大功率電器（如離心機、電爐）共用電源插座，防止電壓波動干擾設備輸出。

2. 儀器檢查

在每次實驗前，應對設備進行以下檢查：

• 檢查電源線、插頭是否完好無損；

• 確認電極杯表面清潔、無鹽分結晶或導電殘留物；

• 打開設備電源后，確認系統(tǒng)自檢通過；

• 檢查顯示屏顯示是否正常，無亂碼或閃爍現(xiàn)象；

• 確認電容擴展模塊與主機連接穩(wěn)固。

若發(fā)現(xiàn)異常情況（如報警提示、氣味或發(fā)熱），必須停止使用并聯(lián)系維護人員。

3. 樣品準備

• 使用對數(shù)生長期的活性細胞，確保細胞狀態(tài)良好；

• 采用電穿孔專用緩沖液，避免使用含鹽培養(yǎng)基；

• 清洗細胞三次以去除多余離子；

• 保持樣品溫度在4℃–10℃之間，以減少電穿孔熱效應；

• 樣品中不得含氣泡，否則會導致電弧放電。

樣品濃度一般控制在10? cells/mL，外源質粒DNA應純度高、無蛋白及鹽分污染。

三、操作中注意事項

1. 電極杯使用規(guī)范

• 根據(jù)實驗需求選擇合適的電極間距（0.1 cm、0.2 cm或0.4 cm）；

• 確保電極杯干凈無水滴，操作前用無菌蒸餾水沖洗并晾干；

• 加入樣品體積一般為0.4–0.8 mL，液體需完全覆蓋電極表面；

• 裝樣后輕輕拍打杯壁排除氣泡。

2. 參數(shù)設定注意事項

• 電壓設定應根據(jù)細胞類型選擇合理范圍：細菌通常為1.5–2.5 kV，哺乳動物細胞為200–600 V；

• 電容設置應與電壓匹配，小電容適合快速放電，高電容適合溫和能量釋放；

• 若使用多脈沖模式，間隔時間應大于樣品恢復所需時間，避免連續(xù)能量疊加造成細胞破裂；

• 設置完成后應再次核對參數(shù)，確保輸入無誤再執(zhí)行實驗。

3. 放電操作安全

• 放電前，確認電極杯安裝到位并蓋好安全蓋；

• 操作人員在放電過程中不得觸碰設備與樣品；

• 放電結束后，待指示燈熄滅至少5秒方可取出樣品；

• 若出現(xiàn)異常聲音或火花，應立即按下“停止”鍵并關閉電源；

• 避免在放電期間開啟或關閉其他實驗設備，以免引起電磁干擾。

4. 樣品處理細節(jié)

• 放電后立即將細胞轉入預溫培養(yǎng)基中恢復；

• 輕輕混勻，避免機械剪切損傷；

• 恢復時間一般為10–15分鐘，之后方可進行篩選或檢測操作。

四、操作后注意事項

1. 樣品處理

• 所有實驗廢液應按照生物安全規(guī)范處理，不得直接倒入下水道；

• 電極杯用蒸餾水沖洗三次，再用70%乙醇擦拭消毒并晾干；

• 若樣品含有危險微生物，應置于專用滅菌容器中高壓滅菌后處理。

2. 數(shù)據(jù)保存與記錄

• 每次實驗完成后，應記錄電壓、電容、放電時間常數(shù)及電壓曲線特征；

• 通過USB接口導出數(shù)據(jù)保存至指定文件夾；

• 記錄實驗日期、樣品編號及操作人員姓名；

• 若使用自動保存功能，需定期備份以防數(shù)據(jù)丟失。

3. 設備關閉

• 實驗結束后先退出系統(tǒng)界面，再關閉電源；

• 拔下電源線，防止長時間待機造成電子元件老化；

• 用干布擦拭設備表面，保持儀器整潔；

• 加蓋防塵罩以防灰塵或潮氣侵入。

五、安全防護注意事項

1. 電氣安全

• 實驗臺必須配有獨立接地裝置；

• 嚴禁帶水操作或在潮濕環(huán)境下放電；

• 不得使用損壞的電源線或適配器；

• 如發(fā)現(xiàn)電擊感，應立即停止操作并切斷電源。

2. 生物安全

• 操作前佩戴一次性手套與護目鏡；

• 處理高危細胞系時應在生物安全柜內進行；

• 放電后樣品容器須及時清潔消毒；

• 禁止在設備附近進食或存放食物。

3. 設備防護

• 禁止自行拆卸設備外殼；

• 不得用有機溶劑擦拭顯示屏與按鈕；

• 若設備長時間不使用，應存放于干燥處并每月通電一次。

六、實驗異常與故障處理注意事項

1. 電弧放電：

• 原因：樣品中存在氣泡或離子濃度高。

• 處理：更換緩沖液、重新制備樣品并確保無氣泡。

2. 放電不完全：

• 原因：電容接觸不良或電源電壓不足。

• 處理：檢查插頭與電容模塊連接，確認電源穩(wěn)定。

3. 電壓曲線不規(guī)則：

• 原因：電極污染或電極間距錯誤。

• 處理：清潔電極，確認所用電極杯型號。

4. 細胞死亡率高：

• 原因：能量過高、電壓過大。

• 處理：降低電壓或減小電容，縮短脈沖時間。

5. 無放電信號顯示：

• 原因：安全蓋未關閉或系統(tǒng)自檢未通過。

• 處理：重新檢查設備狀態(tài)并復位系統(tǒng)。

七、定期維護注意事項

• 每月進行一次功能測試，確認輸出電壓穩(wěn)定；

• 每半年校準一次電容模塊與電壓輸出；

• 檢查電極表面是否氧化，如有污漬可用酒精棉輕拭；

• 定期清理風口與散熱片，防止灰塵堵塞影響散熱性能；

• 若設備長時間未使用，應在使用前進行一次空載試運行。

良好的維護習慣是保證儀器長期高效運行的前提。