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伯樂(lè)電穿孔儀 165-2661 是一款高精度、高穩(wěn)定性的生物電穿孔系統(tǒng)，專為分子生物學(xué)、細(xì)胞工程、基因編輯和藥物研究等實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
它通過(guò)在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生可控的高壓脈沖電場(chǎng)，使細(xì)胞膜暫時(shí)性電穿孔，從而實(shí)現(xiàn)外源性 DNA、RNA、蛋白質(zhì)或其他分子的導(dǎo)入。
與化學(xué)轉(zhuǎn)染或病毒載體等傳統(tǒng)方法相比，電穿孔技術(shù)具有以下顯著優(yōu)勢(shì)：
不依賴載體系統(tǒng)，避免生物安全風(fēng)險(xiǎn)；
適用范圍廣，可用于細(xì)菌、真核細(xì)胞、植物原生質(zhì)體等多種體系；
轉(zhuǎn)化效率高，操作時(shí)間短；
對(duì)細(xì)胞類型適應(yīng)性強(qiáng)，可調(diào)整參數(shù)實(shí)現(xiàn)個(gè)性化導(dǎo)入。
伯樂(lè) 165-2661 采用高精度電壓控制、智能時(shí)間常數(shù)調(diào)節(jié)與雙波形放電系統(tǒng)，能在不同實(shí)驗(yàn)體系下保持能量釋放穩(wěn)定、細(xì)胞損傷最小，為科研人員提供標(biāo)準(zhǔn)化、高重復(fù)性的電轉(zhuǎn)化平臺(tái)。
在電穿孔實(shí)驗(yàn)中，儀器施加的瞬時(shí)高壓電場(chǎng)會(huì)改變細(xì)胞膜的電勢(shì)分布。
當(dāng)跨膜電位差超過(guò) 1.0–1.5 V 時(shí)，膜的磷脂雙層結(jié)構(gòu)被暫時(shí)破壞，形成納米級(jí)可逆孔道。
外源分子通過(guò)這些孔道進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，電場(chǎng)撤除后，膜結(jié)構(gòu)重新恢復(fù)，細(xì)胞保持活性。
這一過(guò)程被稱為 可逆電穿孔效應(yīng)。
影響穿孔效果的主要因素包括：
電場(chǎng)強(qiáng)度 (E = V/d) —— 控制孔道形成的數(shù)量和大??；
脈沖持續(xù)時(shí)間 (τ) —— 決定電場(chǎng)作用時(shí)間；
波形類型 —— 決定能量分布；
導(dǎo)電性與溫度 —— 影響能量傳遞效率。
165-2661 的精準(zhǔn)控制系統(tǒng)可在這些變量之間實(shí)現(xiàn)動(dòng)態(tài)平衡，使能量釋放與細(xì)胞耐受度匹配，從而獲得最佳轉(zhuǎn)化效率。
伯樂(lè)電穿孔儀 165-2661 可廣泛應(yīng)用于分子克隆、基因編輯、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、藥物研究、蛋白表達(dá)及生物育種等領(lǐng)域。以下對(duì)其主要應(yīng)用進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
適用體系：細(xì)菌（E. coli、Bacillus subtilis 等）
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>：實(shí)現(xiàn)外源質(zhì)粒 DNA 的高效導(dǎo)入，為基因克隆與蛋白表達(dá)奠定基礎(chǔ)。
典型參數(shù)設(shè)置：
電壓：1800–2500 V
電容：25 μF
電極間距：0.2 cm
波形：指數(shù)衰減波
τ 值：約 4.5 ms
應(yīng)用說(shuō)明：
165-2661 在細(xì)菌體系中表現(xiàn)出優(yōu)異的重復(fù)性與轉(zhuǎn)化效率。
由于其放電時(shí)間精確可控，可有效避免電弧放電，提高樣品安全性。
轉(zhuǎn)化后的菌株用于后續(xù)基因克隆、突變分析或重組蛋白表達(dá)，是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用最廣泛的領(lǐng)域之一。
適用體系：酵母（Saccharomyces cerevisiae、Pichia pastoris）
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>：導(dǎo)入線性 DNA、質(zhì)粒載體或外源基因，用于遺傳工程或代謝工程研究。
典型參數(shù)設(shè)置：
電壓：1200–1600 V
電容：500 μF
波形：指數(shù)波
脈沖次數(shù)：2
間隔：1.0 s
應(yīng)用說(shuō)明：
酵母細(xì)胞壁較厚，需適度提高電容延長(zhǎng)能量作用時(shí)間。
165-2661 的自動(dòng)電阻匹配系統(tǒng)可根據(jù)樣品導(dǎo)電率調(diào)整時(shí)間常數(shù)，使細(xì)胞穿孔均勻且可逆。
常用于重組蛋白表達(dá)、代謝通路改造、CRISPR 基因敲除等研究。
適用體系：CHO、HEK293、NIH3T3 等動(dòng)物細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>：實(shí)現(xiàn)外源 DNA、mRNA 或 siRNA 的導(dǎo)入，用于基因表達(dá)調(diào)控、藥物篩選與信號(hào)通路研究。
典型參數(shù)設(shè)置：
電壓：400–800 V
電容：800 μF
波形：方波
脈沖次數(shù)：2
間隔：1.0 s
時(shí)間常數(shù)：7–8 ms
應(yīng)用說(shuō)明：
方波模式能在較低電壓下維持穩(wěn)定電場(chǎng)，有助于維持細(xì)胞活性。
165-2661 通過(guò)精確電壓調(diào)節(jié)和能量補(bǔ)償機(jī)制，確保電場(chǎng)均勻分布，避免局部過(guò)熱。
廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究、基因治療載體開(kāi)發(fā)及細(xì)胞信號(hào)通路實(shí)驗(yàn)。
適用體系：植物原生質(zhì)體、藻類細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>：導(dǎo)入外源基因、mRNA 或蛋白質(zhì)，用于植物分子育種、基因編輯與功能驗(yàn)證。
典型參數(shù)設(shè)置：
電壓：600–900 V
電容：1000 μF
波形：方波
脈沖次數(shù)：3
間隔：0.8 s
τ 值：約 8–9 ms
應(yīng)用說(shuō)明：
植物原生質(zhì)體無(wú)細(xì)胞壁，對(duì)電場(chǎng)較敏感。
165-2661 的多脈沖功能可實(shí)現(xiàn)逐步能量施加，促進(jìn)基因?qū)胪瑫r(shí)保護(hù)膜完整性。
適用于基因功能研究、CRISPR/Cas9 系統(tǒng)遞送和農(nóng)作物基因改良實(shí)驗(yàn)。
適用體系：哺乳動(dòng)物細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>：將 siRNA、miRNA 或 mRNA 導(dǎo)入細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)基因沉默或瞬時(shí)表達(dá)。
典型參數(shù)：
電壓：500–650 V
電容：600–800 μF
波形：方波
脈沖次數(shù)：2
間隔：1 s
應(yīng)用說(shuō)明：
電穿孔法相比脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，能有效導(dǎo)入大分子 RNA，不受細(xì)胞狀態(tài)和培養(yǎng)條件影響。
165-2661 可穩(wěn)定保持電場(chǎng)強(qiáng)度和時(shí)間常數(shù)，使 RNA 導(dǎo)入均一且細(xì)胞活性高。
常用于基因功能研究、蛋白瞬時(shí)表達(dá)及信號(hào)調(diào)控分析。
適用體系：動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞、真菌細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>：通過(guò)電場(chǎng)誘導(dǎo)膜融合，獲得雜交細(xì)胞或多核細(xì)胞，用于抗體工程或細(xì)胞生物學(xué)研究。
典型參數(shù)：
預(yù)處理電場(chǎng)：低電壓（100–200 V/cm）使細(xì)胞對(duì)齊；
融合電場(chǎng)：高電壓脈沖（800–1200 V/cm）觸發(fā)融合；
波形：方波；
脈沖持續(xù)時(shí)間：20–40 μs。
應(yīng)用說(shuō)明：
165-2661 的精確時(shí)間控制和多波形輸出特性使其可在融合階段穩(wěn)定產(chǎn)生短時(shí)強(qiáng)脈沖，促進(jìn)細(xì)胞膜接觸與融合。
常用于制備雜交瘤細(xì)胞、抗體產(chǎn)生細(xì)胞系及植物體細(xì)胞雜交。
適用體系：動(dòng)物細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、細(xì)胞模型體系
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>：利用電場(chǎng)促進(jìn)納米藥物、載體或藥物分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，實(shí)現(xiàn)高效給藥與藥理研究。
典型參數(shù)：
電壓：300–700 V
電容：800 μF
波形：方波
脈沖次數(shù)：1–3
間隔：1 s
應(yīng)用說(shuō)明：
165-2661 可精確控制能量釋放速率，防止藥物分子因過(guò)熱失活。
在藥理學(xué)、腫瘤電化學(xué)治療（ECT）及藥物載體系統(tǒng)優(yōu)化中有重要應(yīng)用價(jià)值。
165-2661 內(nèi)置數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)，可實(shí)時(shí)記錄電壓、電流、時(shí)間常數(shù)、能量釋放率及溫度信息。
用戶可通過(guò) USB 導(dǎo)出數(shù)據(jù)文件，進(jìn)行以下分析：
電壓-時(shí)間曲線分析：評(píng)估放電穩(wěn)定性；
τ 值統(tǒng)計(jì)：判斷不同導(dǎo)電體系下的能量衰減趨勢(shì)；
轉(zhuǎn)化效率計(jì)算：結(jié)合菌落形成或熒光強(qiáng)度測(cè)定結(jié)果，量化轉(zhuǎn)化效果；
存活率評(píng)估：通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)或活性染色評(píng)估電場(chǎng)作用后的細(xì)胞狀態(tài)。
這些數(shù)據(jù)有助于建立電穿孔的經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)庫(kù)，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供可靠的參數(shù)優(yōu)化參考。
伯樂(lè)電穿孔儀 165-2661 在實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中表現(xiàn)出以下技術(shù)優(yōu)勢(shì)：
高精度能量控制
輸出電壓誤差 ≤ ±1%，時(shí)間常數(shù)精度 ±0.05 ms，確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。
自動(dòng)電阻匹配
根據(jù)樣品導(dǎo)電率自動(dòng)調(diào)整放電回路，防止能量過(guò)度釋放。
雙波形輸出
可在指數(shù)波與方波之間自由切換，適配不同生物體系。
多脈沖運(yùn)行模式
可設(shè) 1–10 次放電，支持復(fù)雜體系下的能量分級(jí)作用。
數(shù)據(jù)追溯系統(tǒng)
自動(dòng)保存每次實(shí)驗(yàn)的電擊參數(shù)與波形數(shù)據(jù)，便于分析。
高安全性設(shè)計(jì)
具備蓋鎖保護(hù)、自動(dòng)放電、過(guò)溫報(bào)警、接地檢測(cè)等多重防護(hù)機(jī)制。
適應(yīng)范圍廣
從原核生物到真核細(xì)胞，從單細(xì)胞到多細(xì)胞體系均可使用。
隨著生物技術(shù)和納米醫(yī)學(xué)的發(fā)展，165-2661 的電穿孔技術(shù)正向多方向拓展：
CRISPR/Cas 基因編輯系統(tǒng)遞送
可高效導(dǎo)入 Cas9 mRNA 和 sgRNA，實(shí)現(xiàn)精確基因敲除。
細(xì)胞免疫治療研究
用于 CAR-T、TCR-T 細(xì)胞的基因修飾與抗原呈遞優(yōu)化。
疫苗與核酸藥物開(kāi)發(fā)
通過(guò)電穿孔實(shí)現(xiàn) DNA 疫苗或 mRNA 藥物的細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入驗(yàn)證。
合成生物學(xué)研究
用于人工代謝通路重建與底盤細(xì)胞改造。
電化學(xué)與生物物理研究
用于研究細(xì)胞膜電特性、離子通道響應(yīng)及能量傳導(dǎo)機(jī)制。
多細(xì)胞組織電穿孔應(yīng)用
配合電針或電極陣列，可用于體外組織片段或類器官的基因?qū)胙芯俊?/span>
為了保證實(shí)驗(yàn)效果，建議遵循以下優(yōu)化原則：
控制導(dǎo)電率：緩沖液導(dǎo)電率應(yīng)低于 1.5 mS/cm；
預(yù)冷操作：樣品、電擊杯與 ShockPod 預(yù)冷可減少熱損傷；
分步調(diào)整電壓：從推薦值的 80% 開(kāi)始逐步增加；
監(jiān)測(cè) τ 值：最佳范圍為 4–8 ms；
避免電弧：確保樣品無(wú)氣泡，液體體積占電擊杯 70–80%；
及時(shí)轉(zhuǎn)入恢復(fù)液：放電后 10 秒內(nèi)將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液修復(fù)。
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